Famantarana ny votoatin'ny asidra oksalika ao anaty voankazo sy legioma amin'ny alàlan'ny chromatography ranoka avo lenta (HPLC)

Famaritana ny Asidra Oksalika Ny votoatin'ny voankazo sy legioma amin'ny alàlan'ny High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)
1. Fitsipiky ny fanandramana sy ny famolavolana fomba fiasa
Amin'ny maha-asidra organika mahazatra amin'ny voankazo sy legioma azy, ny votoatin'ny asidra oksalika dia misy fiantraikany mivantana amin'ny tsiro sy ny sandan'ny sakafo. Ity andrana ity dia mampiasa chromatography ranoka avo lenta (RP-HPLC) izay miovaova ny dingana. Eo ambanin'ny fepetra asidra mihetsika, ny asidra oksalika dia sarahina amin'ny akora manelingelina amin'ny alàlan'ny tsanganana chromatography C18. Ny mpitsikilo ultraviolet napetraka amin'ny 210 nm dia ampiasaina amin'ny fanadihadiana quantitative, mifototra amin'ny toetran'ny fidiran'ny UV amin'ny vondrona carboxyl ao amin'ny molekiola asidra oksalika.
2. Fiolahana mahazatra sy fanomanana santionany
Fomba fanalefahana gradient no ampiasaina hanomanana vahaolana mahazatra: lanjao tsara ny 25.0 mg ny asidra oksalika dihydrate ary afangaro amin'ny rano madio be ho 25 mL mba hahazoana vahaolana tahiry 1 mg/mL. Afangaro tsikelikely ho lasa andiana vahaolana mahazatra amin'ny 50, 100, 200, 400, ary 800 µg/mL izany, ary atsindrona intelo ny fifantohana tsirairay.
Ho an'ny fanomanana santionany, ampiasaina ny fitrandrahana amin'ny alalan'ny microwave: mandanja 5.00 g ny homogenate voankazo/legioma, ampio 10 mL ny vahaolana asidra hydrochloric 0.1 mol/L, andrahoy amin'ny microwave mandritra ny 10 minitra amin'ny 60°C, sivanina amin'ny alalan'ny sivana membrane 0.45 µm, ary angony ny sivana mba hanaovana fitiliana.
3. Fanatsarana ny fepetra kromatografika
Ny dingana finday dia rafitra 0.01 mol/L potassium dihydrogen phosphate buffer (pH 2.5)–acetonitrile (95:5), miaraka amin'ny tahan'ny fikorianan'ny 0.8 mL/min ary mari-pana 35°C. Ny fanitsiana ny tahan'ny acetonitrile dia mampiseho fa rehefa mihoatra ny 10% ny dingana organika, dia mihena ho latsaky ny 3 minitra ny fotoana fitazonana ny asidra oksalika, saingy mitranga ny tailing ambony indrindra. Ao anatin'ny fepetra farany nohatsaraina, ny fotoana fitazonana ny asidra oksalika dia 4.2 minitra, ka mahatratra fisarahana tanteraka amin'ny asidra sitrika sy asidra malika mifanila aminy (resolution > 1.5).
4. Fanamarinana ny fomba fiasa
Ny fanamarinana elanelana mitsivalana dia mampiseho fifandraisana mitsivalana tsara eo amin'ny velaran'ny tampon'ny tifitra sy ny fifantohana eo amin'ny 10–1000 µg/mL (R² = 0.9993). Ny fetran'ny fahitana (LOD), izay voafaritry ny fomba tahan'ny signal-to-noise, dia 0.5 µg/mL. Amin'ny fitsapana famerimberenana, ny RSD ho an'ny famaritana famerimberenana enina amin'ny santionan'ny epinara mitovy dia 1.8%. Ny fanandramana famerenana amin'ny laoniny ny spike amin'ny ambaratonga telo (80%, 100%, ary 120%) dia miteraka famerenana amin'ny laoniny eo amin'ny 98.2%, 102.4%, ary 97.8% tsirairay avy, izay mahafeno ny fepetra takiana amin'ny fanadihadiana quantitative.
5. Famakafakana ireo santionany tena izy
Voankazo sy legioma enina azo amidy eny an-tsena no nosedraina: epinara (356 ± 12 mg/100 g), seleria (215 ± 9 mg/100 g), voatabia (18 ± 2 mg/100 g), paoma (6 ± 1 mg/100 g), akondro (tsy hita), ary brokoli (89 ± 5 mg/100 g). Ny fampitahana amin'ny fomba fenitra nasionaly (GB 5009.277-2016) dia mampiseho fa latsaky ny 5% ny fivilian-dalana eo amin'ireo fomba roa ireo, izay manamarina ny fahatokisana an'ity fomba ity. Indrindra indrindra, ny fomba HPLC dia mampiseho fahatsapana ambony kokoa noho ny fomba titration nentim-paharazana rehefa mamakafaka santionany ambany votoaty.
6. Fanamarihana fototra
Fehezo tsara ny sandan'ny pH mandritra ny fitsaboana mialoha ny santionany. Raha mihoatra ny 3 ny pH-n'ny nalaina, dia hiteraka vokatra ratsy ny firotsahan'ny kalsioma oksalata. Tokony homanina vaovao isan'andro ny dingana finday mba hisorohana ny firotsahan'ny sira sy ny fikatonan'ny tsanganana. Aorian'ny tsindrona 20, dia sasao amin'ny rano acetonitrile-rano (30:70) mandritra ny 30 minitra ny tsanganana mba hisorohana ny fahasimban'ny fahombiazan'ny tsanganana. Ho an'ny santionany misy loko (ohatra, laisoa volomparasy), dia asaina manampy dingana fanadiovana ny dingana solid-phase alohan'ny tsindrona.
7. Torolalana momba ny fampiharana sy ny fanitarana
Azo itarina amin'ny fitadiavana asidra oksalika ao anaty santionany biolojika toy ny urine sy ny ra ity fomba ity. Amin'ny alàlan'ny fanitsiana ny firafitry ny dingana finday (ohatra, ny fanampiana tetrabutylammonium hydroxide), dia azo faritana miaraka ny asidra oksalika sy ny metabolites-ny. Raha ampiarahina amin'ny detector spectrometry mass, dia azo apetraka ny fomba fitadiavana soritra marina kokoa. Ao amin'ny indostrian'ny fanodinana sakafo, ity fomba ity dia afaka manome fanohanana angon-drakitra manan-danja ho an'ny fisafidianana karazana asidra oksalika ambany sy ny fanatsarana ny fizotran'ny fandrahoan-tsakafo.